V současné době je intravitální diagnostika tuberkulózy obtížná kvůli rozšířené prevalenci atypických mykobakterií. Pro odlišení se používá simultánní test s alergenem KAM. Jakub, koně, buvoli, prasata od 2 měsíců. Velbloudi od 1 roku, jeleni, jeleni, kožešinová zvířata a ptáci od 6 měsíců. Krávy, buvoli od 2 měsíců. Krávy, buvoli, jaci a velbloudi jsou vyšetřováni bez ohledu na období březosti. Kozy, ovce, prasnice, koně, psi, samice kožešinových zvířat – nejdříve měsíc po narození. Není povoleno testovat zvířata alergickou metodou na tuberkulózu do 3 týdnů po vakcinaci nebo po ošetření proti helmintům. Jediný intradermální tuberkulinový test. Používá se pro skot v prosperujících farmách, stejně jako pro prasata, velbloudy, jeleny, jeleny, buvoly, psy, kočky, kožešinová zvířata a ptáky. Tuberkulin se podává v dávce 0,2 ml skotu a buvolům do střední třetiny krku. U býků je tuberkulin injikován do subkaudálního záhybu, u velbloudů do kůže břišní stěny v oblasti třísel a u prasat z vnější plochy ucha, 2 cm od jeho základny. U 2-3 měsíčních selat lze tuberkulin podat injekčně do kůže dolní části zad ve vzdálenosti 5-8 cm od páteře. U ovcí a koz se tuberkulin aplikuje injekčně pod kůži dolního víčka. U psů a kožešinových zvířat, kromě norků, se tuberkulin vstřikuje do oblasti vnitřní strany stehna. Norky se vstřikují intrapalpebrálně, tedy do horního víčka. U koček se tuberkulin vstřikuje do oblasti vnitřního povrchu ucha, u kuřat – do kůže vousů, u krůt do submandibulární náušnice a u hus a kachen do submandibulárního záhybu. Reakce na podání tuberkulinu u skotu, buvolů, jaků, velbloudů, jelenů a jelenů se bere v úvahu a hodnotí se po 72 hodinách. U koz, ovcí, prasat, psů, koček, kožešinových zvířat po 48 hodinách. U ptáků – po 30-36 hodinách. U zvířat infikovaných mykobakteriemi se reakce na tuberkulin projevuje jako difuzní otok, těstovitost a bez jasných hranic. To je doprovázeno hyperemií a bolestí kůže. V některých případech je otok hustý, nebolestivý a má jasné hranice. Když je zjištěn otok u skotu, buvolů, jaků, velbloudů, jelenů a maralů, měří se tloušťka kožní řasy pomocí kutimetru a porovnává se s tloušťkou záhybu nezměněné kůže v blízkosti místa vpichu tuberkulinu. Zvířata jsou považována za reagující na tuberkulin, když kožní řasa zesílí o 3 mm nebo více. U plemenných býků, ovcí, koz, prasat, psů, koček, kožešinových zvířat a ptáků se předpokládá, že reagují, když se v místě vpichu tuberkulinu vytvoří otok. Dvojitý intradermální tuberkulinový test používá se u skotu, buvolů, jaků, velbloudů, jelenů, jelenů v chovech nepříznivých pro tuberkulózu. V den záznamu reakce se zvířatům, která nereagovala na první injekci tuberkulinu v dávce 10000 0,2 IU v 24 ml, znovu aplikuje tuberkulin ve stejné dávce a na stejném místě, reakce se bere v úvahu po 5 hodinách. Zvířata jsou považována za reagující, když kožní řasa zesílí o XNUMX mm nebo více. Oční test (oční test) se používá při studiu koní a skotu. Při tomto testu se aplikuje 3-5 kapek tuberkulinu na spojivku oka se zataženým spodním víčkem. Po 5-6 dnech se tuberkulin znovu zavede. Po prvním podání se reakce bere v úvahu po 6, 9, 12, 24 hodinách. Po druhé injekci se reakce bere v úvahu po 3, 4, 6, 9, 12 hodinách. Zvířata jsou považována za reagující, když se vytvoří hlenovitý nebo hnisavý sekret, který se hromadí ve spojivkovém vaku nebo vytéká ve formě provazce z vnitřního koutku oka. Spojivka je hyperemická a oteklá. Intravenózní tuberkulinový test. Používá se pouze u dospělého skotu, s výjimkou krav měsíc před otelením a měsíc po něm. Tuto metodu nelze použít ke studiu zvířat s tělesnou teplotou nad 39,5 stupně. Tuberkulin se podává intravenózně v dávce 1 ml na každých 100 kg živé hmotnosti, po podání se začíná měřit teplota zvířete: po 3, 6, 9 hodinách. Zvířata se zvýšením tělesné teploty o 1 ºС nebo více jsou považována za reagující. Pokud jsou v úspěšné farmě při rutinních alergických testech skotu identifikována reagující zvířata, jsou navíc vyšetřena buď oftalmologickým testem, nebo intravenózním tuberkulinovým testem. Zvířata, která na tyto testy reagují, jsou podrobena komisionální diagnostické porážce. Pokud jsou zjištěny patologické změny typické pro tuberkulózu, je diagnóza považována za stanovenou. Pokud nejsou zjištěny charakteristické změny v orgánech a tkáních, provádějí se bakteriologické studie biomateriálu z usmrcených zvířat. Pokud jsou kultury mykobakterií skotu nebo lidí izolovány nebo s pozitivním biologickým testem na laboratorních zvířatech, je diagnóza rovněž považována za stanovenou. Pokud je reakce na oční test nebo nitrožilní podání negativní, jsou všechna zvířata na farmě testována simultánním alergickým testem. Pokud se potvrdí skutečnost senzibilizace zvířat atypickými mykobakteriemi, považuje se stádo za prosté tuberkulózy a následné plánované studie se provedou pomocí simultánního testu. Pokud jsou na bezpečné farmě identifikována prasata, kozy nebo ovce, které reagují na tuberkulin, je pro diagnostické účely poraženo 3-5 zvířat s nejvýraznější reakcí. Bez ohledu na přítomnost nebo nepřítomnost patologických změn je materiál vybrán pro bakteriologické vyšetření. V případě izolace bovinních nebo lidských mykobakterií nebo pozitivního biologického testu se tuberkulóza považuje za prokázanou. Pokud jsou u uhynulého nebo uhynulého ptáka zjištěny patologické změny charakteristické pro tuberkulózu, provede se bakterioskopie biomateriálu. Pokud je výsledek pozitivní, považuji diagnózu za stanovenou. U zvířat jiných druhů je tuberkulóza diagnostikována na základě výsledků patologických a bakteriologických studií.
Návod k použití tuberkulínů pro diagnostiku tuberkulózy u savců a ptáků
(schváleno Hlavním veterinárním ředitelstvím Ministerstva zemědělství SSSR dne 10. prosince 1970, nahrazující Manuál z 22. listopadu 1962)
ZÁRUKA:
Tento pokyn je prohlášen za neplatný
Místo toho byly zavedeny pokyny k použití tuberkulínů pro alergickou diagnostiku tuberkulózy u savců a ptáků, schválené Hlavním ředitelstvím veterinární medicíny Ministerstva zemědělství SSSR dne 9. února 1978.
1. K diagnostice tuberkulózy použijte:
u skotu suchý purifikovaný (PPD) tuberkulin (protein purifikovaný derivát) nebo alttuberkulin pro savce;
u buvolů, velbloudů, koní, jelenů, ovcí, koz, psů, opic, kožešinových zvířat pouze alttuberkulin pro savce;
u prasat je jak alttuberkulin pro savce, tak tuberkulin pro ptáky;
u ptáků tuberkulin pro ptáky.
2. Alttuberkulin pro savce je sterilní filtrát usmrcených kultur původce tuberkulózy hovězího i lidského typu, odpařený na 1/10 původního objemu, který má vzhled průhledné kapaliny tmavě hnědé barvy, viskózní konzistence, a má specifický zápach.
Tuberkulin pro ptáky je analogem alttuberkulinu pro savce, ale připravuje se z kmenů původce ptačí tuberkulózy.
Suchý purifikovaný tuberkulin je amorfní hmota světle hnědé barvy s šedavým nádechem, skládající se z lyofilizovaných vysrážených proteinů kulturního filtrátu původce hovězí a lidské tuberkulózy, pěstovaných na syntetickém živném médiu.
3. Doba použitelnosti alttuberkulinu pro savce a ptačího tuberkulinu je 5 let, suchého čištěného tuberkulinu 3 roky od data výroby biotovárnou za předpokladu, že je skladován v temné chladné místnosti.
4. Každá ampule (lahvička) s tuberkulinem se před použitím zkontroluje. Pokud se v nich najdou nějaké nečistoty, plísně, vločky, praskliny skla nebo chybějící etikety, ampule (lahvičky) se vyhodí. Použití zbytků léčiva z otevřených ampulí (lahviček) druhý den není povoleno.
5. K intradermální aplikaci tuberkulinu se používají tenké jehly pro intradermální injekce vyrobené z nerezové oceli a injekční stříkačky s jezdcem o objemu 1 nebo 2 ml. K aplikaci tuberkulinu na spojivku oka se používají běžné oční pipety. Stříkačky, jehly a pipety se sterilizují vyvařením v destilované nebo převařené vodě bez přidání dezinfekčních prostředků.
Metoda intradermální tuberulinizace
6. Tuberkulin se podává intradermálně:
pro dospělý skot, buvoly, jeleny (jeleny) – v oblasti střední třetiny krku; pro telata – v oblasti lopatky; pro kozy – v podocasním záhybu; pro prasata – v oblasti vnějšího povrchu ucha, blíže k jeho základně (alttuberkulin pro savce na jedné straně, tuberkulin pro ptáky na straně druhé); pro ovce, psy, opice a kožešinová zvířata (kromě norků) – v oblasti vnitřního bezsrstého povrchu stehenního nebo loketního záhybu; minkam — v horním víčku; velbloudi – v horní třetině břicha; kuram — ve vousech; pro krůty – v axilárním záhybu nebo submandibulární náušnici; pro husy a kachny – v submandibulárním záhybu; bažanti, pávi, papoušci, holubi, jeřábi, volavky, čápi, plameňáci – v oblasti vnější strany bérce, 1-2 cm od kloubu.
7. Před podáním tuberkulinu se srst v místě vpichu ostříhá nebo oholí (vytrhne peří), kůže se ošetří 70° rektifikovaným lihem nebo 0,5% roztokem kyseliny karbolové.
8. Tuberkulin se používá v dávce 0,2 ml, bez ohledu na typ a věk zvířat, a u ptáků a norků – v dávce 0,1 ml; dospělí velbloudi – 0,3 ml, velbloudi od 1 do 3 let – 0,2 ml.
9. Suchý purifikovaný tuberkulin se bezprostředně před použitím ředí speciálním rozpouštědlem zaslaným biofabrikou. Obsah jedné ampulky (lahvičky) léčiva se rozpustí v jedné ampulce (lahvičce) rozpouštědla. Ampule s rozpouštědlem a návod k použití léku jsou umístěny v biotovárně v každé krabici s alergenem. Diagnostická dávka suchého purifikovaného tuberkulinu pro skot jsou tuberkulinové jednotky (TU) obsažené v 0,2 mg léčiva rozpuštěného v 0,2 ml rozpouštědla.
10. Injekce tuberkulinu do kůže, která má traumatická poranění (těsnění nebo abscesy, poškození houbami, roztoči, helminty) je zakázáno.
11. Není povoleno vyšetřovat vyhublá zvířata, dělohy do 3 týdnů před porodem a tři týdny po porodu, stejně jako zvířata do dvou týdnů po vakcinaci intradermální tuberulinizací.
12. Zaúčtování a hodnocení reakce na první intradermální injekci tuberkulinu se provádí u skotu, buvolů, velbloudů a jelenů 72 hodin po podání; u koz, ovcí a prasat po 48 a 72 hodinách; u psů, opic a kožešinových zvířat po 24 a 48 hodinách; u ptáků po 30-36 hodinách.
Opakovaná injekce tuberkulinu se provádí na stejném místě a ve stejné dávce ihned po odečtení reakce na jeho první injekci. Reakce se bere v úvahu 24 hodin po druhé injekci tuberkulinu (viz bod 26).
13. U skotu, buvolů a jelenů infikovaných původcem tuberkulózy se specifická intradermální reakce na tuberkulin obvykle začíná objevovat 18-20 hodin po jeho podání a dosahuje maxima za 72 hodin. Reakce se projevuje v místě vpichu léku ve formě difúzního otoku těstovité konzistence, který zpravidla nemá jasné hranice s okolní tkání. Tvorba edému je doprovázena zvýšením místní teploty, hyperemií a bolestí zanícené oblasti kůže. Pokud je zvíře špatně živeno nebo má generalizovaný tuberkulózní proces, může být reakce mírná nebo zcela chybí.
Reakce je zohledněna přítomností těchto příznaků a výsledky měření tloušťky kožní řasy v místě vpichu tuberkulinu. Pokud jsou přítomny indikované známky zánětu a ztluštění kožní řasy při podání alttuberkulinu o 5 mm a více, nebo při podání suchého purifikovaného tuberkulinu o 4 mm a více, je reakce považována za pozitivní. Pokud jsou méně výrazné známky zánětu a ztluštění kožní řasy při injekci alttuberkulinu o 3-4 mm nebo při zavedení suchého purifikovaného tuberkulinu o 2-3 mm, je reakce považována za pochybnou. Pokud je zesílení kožní řasy menší než 3 mm pro alttuberkulin a menší než 2 mm pro suchý purifikovaný tuberkulin, je reakce považována za negativní.
14. Za pozitivní reakci se u koz a ovcí považuje vznik difuzního těstovitého otoku o velikosti minimálně tříkopecné mince v místě vpichu tuberkulinu. Pokud je hustý, omezený otok menší velikosti, je reakce považována za pochybnou, a pokud nejsou žádné změny v místě vpichu tuberkulinu, je považována za negativní.
15. U prasat je pozitivní reakce charakterizována tvorbou edematózního otoku v místě vpichu tuberkulinu o velikosti dvoukopecké mince nebo více, zvýšením místní teploty, výskytem bolesti a hyperémie. U zdravých zvířat nejsou v místě vpichu tuberkulinu zaznamenány žádné viditelné změny.
16. Před podáním tuberkulinu opicím se navíc ředí fyziologickým roztokem nebo destilovanou vodou v poměru 1:1 – 1:2. Když se u zvířat objeví difuzní bolestivý otok v místě vpichu, je reakce považována za pozitivní.
17. U psů a kožešinových zvířat se reakce objevuje 24-48 hodin po podání tuberkulinu a trvá až 72-96 hodin. Za pozitivní reakci je považován vznik bolestivého difúzního otoku v místě vpichu tuberkulinu. Pokud nedojde k žádné změně, je reakce považována za negativní.
U norků je pozitivní reakce charakterizována otokem víčka, slzením a výtokem hnisu z koutku oka. Při mírném otoku je reakce považována za pochybnou, a pokud nedojde k žádným změnám, je považována za negativní. Norkové, kteří odpověděli pochybně, jsou po jednom měsíci podrobeni novému vyšetření.
18. U velbloudů trvá reakce na podání tuberkulinu 3-4 dny a projevuje se ve formě difuzního otoku, těstovitého a bolestivého. Reakce je považována za pozitivní, když se v místě vpichu tuberkulinu vytvoří difuzní, těstovitý, bolestivý otok se ztluštěním kožní řasy 7 mm nebo více.
Pokud kožní řasa zesílí od 3 do 6 mm, je reakce hodnocena jako pochybná. Pokud nedojde ke změnám nebo dojde k mírně bolestivému ztluštění kůže se ztluštěním do 3 mm, je reakce považována za negativní.
19. Ptáci všech druhů jsou jednou testováni ptačím tuberkulinem. Pozitivní reakce je charakterizována vznikem těstovitého, horkého, bolestivého otoku v místě vpichu tuberkulinu, u kuřat otok vousů, povislé a horké.
Metoda oční tuberkulinizace
20. Oční tuberkulinizace se provádí dvakrát v intervalu 5-6 dnů. Pro diagnostiku tuberkulózy u skotu, buvolů a koní se reakce bere v úvahu 3, 6, 9, 12 a 24 hodin po první injekci a 3, 6, 9 a 12 hodin po druhé injekci tuberkulinu.
21. K provedení oční tuberkulinizace u skotu se používá alttuberkulin nebo suchý purifikovaný tuberkulin. Studium buvolů a koní se provádí pomocí alttuberculinu.
22. Tuberkulin v množství 3-5 kapek se aplikuje pipetou na sliznici dolního víčka nebo na povrch rohovky při zataženém dolním víčku. Při mechanické kontaminaci, telazióze nebo zánětlivých procesech ve spojivce a očních membránách není povoleno studovat zvířata metodou oční tuberkulinizace.
23. U zvířat infikovaných tuberkulózou se reakce na zavedení tuberkulinu objevuje po 3-6 hodinách a trvá až 15-24 hodin. Pozitivní reakce je charakterizována uvolňováním hlenohnisavého nebo hnisavého sekretu z vnitřního koutku oka, který se nejprve hromadí ve spojivkovém vaku v samostatných kulatých útvarech a závitech a poté vytéká ve formě provazce. Současně je pozorováno hojné slzení, hyperémie a otok spojivky. Při silné reakci vyčnívá edematózní spojivka nad okraj víčka a na oční skléře je patrný želatinový infiltrát.
Při počátečním podání tuberkulinu mohou být známky reakce méně výrazné. Pro správné zohlednění výsledků tuberkulinizace očního víčka zvířete je proto nutné elevovat a určit povahu a intenzitu zánětlivých reakcí na spojivce.
Pokud se tvoří pouze slizniční sekrece, mírná hyperémie a mírný otok spojivky, je reakce považována za pochybnou.
Jako negativní reakce je hodnocena krátkodobá hyperémie a slzení s tvorbou malého množství slizniční sekrece a také absence jakýchkoliv změn.
24. Při komplexní výzkumné metodě (simultánní oční a intradermální testování) se má za to, že zvíře reaguje na tuberkulin, pokud je zjištěna pozitivní reakce na jeden nebo oba testy.
25. Studium zvířat na tuberkulózu metodou tuberkulózy se provádí způsobem a ve lhůtách stanovených „Pokyny k opatřením pro prevenci a eliminaci tuberkulózy zvířat“, schválenými Hlavním veterinárním ředitelstvím SSSR. Ministerstvo zemědělství.
26. V chovech bez tuberkulózy (stáda, školky, farmy, stáda) je hlavní výzkumnou metodou intradermální tuberkulinový test. Navíc, pokud je získán negativní výsledek pro celou studijní skupinu zvířat, opětovné podávání tuberkulinu se neprovádí. Pokud jsou identifikována zvířata, která reagují na tuberkulin, postupujte následovně:
Pozitivně reagující zvířata jsou izolována, sporně reagující a nereagující zvířata jsou znovu injikována lékem na stejné místo a ve stejné dávce, dvojitá oční tuberulinizace se provádí také u skotu a buvolů. S pozitivně reagujícími zvířaty se zachází v souladu s „Pokynem k opatřením k prevenci a eliminaci tuberkulózy zvířat“. Zvířata, která pochybně reagují na druhou injekci tuberkulinu, jsou izolována a po 30-45 dnech jsou dále vyšetřována pomocí dvojité intradermální a dvojité oční tuberkulinizace. V tomto případě jsou zvířata, která opět poskytla sporné výsledky studie, považována za pozitivně reagující na tuberkulin.
27. V chovech nepostižených tuberkulózou se současně vyšetřuje skot a buvoli metodou dvojité intradermální a dvojité oční tuberulinizace. Ovce, kozy, psi, opice a kožešinová zvířata (kromě norků) – dvojitá intradermální; koně – dvojité oční zkoušky. Prasata jsou vyšetřována dvojitým intradermálním testem současně s tuberkulinem pro savce a ptáky, norci jsou vyšetřováni jediným intradermálním testem.
